賽默飛Qubit4.0熒光計(jì)以“準(zhǔn)、省、穩(wěn)”著稱,是NGS建庫(kù)、單細(xì)胞測(cè)序等微量核酸蛋白實(shí)驗(yàn)的“金標(biāo)準(zhǔn)”。然而,再靈敏的光學(xué)系統(tǒng)也抵不過(guò)灰塵、溫度漂移和耗材老化。想讓儀器十年如一日地給出可信濃度,必須把校準(zhǔn)與維護(hù)做成“日常動(dòng)作”,而非“應(yīng)急維修”。
一、日常校準(zhǔn):確保數(shù)據(jù)精準(zhǔn)的核心步驟?
賽默飛Qubit4.0熒光計(jì)的校準(zhǔn)需遵循固定周期,建議每周至少1次,若用于高精度實(shí)驗(yàn)或頻繁使用,應(yīng)縮短至每3天1次。校準(zhǔn)前需準(zhǔn)備標(biāo)準(zhǔn)熒光溶液(如羅丹明B標(biāo)準(zhǔn)液、熒光素鈉標(biāo)準(zhǔn)液等,濃度需覆蓋常用檢測(cè)范圍)、干凈的石英比色皿及無(wú)塵擦拭布。?
首先,開(kāi)啟儀器預(yù)熱30分鐘,待光源與檢測(cè)器穩(wěn)定后進(jìn)入校準(zhǔn)模式。將空白溶劑(與樣品溶劑一致,如去離子水、乙醇)注入比色皿,放入樣品室,執(zhí)行“空白校準(zhǔn)”,消除溶劑背景熒光干擾,儀器會(huì)自動(dòng)將空白信號(hào)值歸零。隨后,依次注入不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)熒光溶液,每次測(cè)量前用無(wú)塵布擦拭比色皿外壁,避免指紋、污漬影響光路,且需確保比色皿放置方向一致(如箭頭朝向光源)。儀器會(huì)根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)溶液的熒光強(qiáng)度繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,完成校準(zhǔn)后需驗(yàn)證:選取中間濃度的標(biāo)準(zhǔn)液再次測(cè)量,若誤差超過(guò)±2%,需重新校準(zhǔn),直至數(shù)據(jù)符合要求。?
二、日常維護(hù):延長(zhǎng)儀器壽命的關(guān)鍵措施?
?。ㄒ唬┣鍧嵄pB(yǎng):防止污染影響性能?
每日使用后,需及時(shí)清潔樣品室:關(guān)閉儀器電源,用蘸有75%乙醇的無(wú)塵布擦拭樣品室內(nèi)壁,去除殘留的樣品液滴或灰塵,尤其注意避免液體滲入光學(xué)部件。比色皿需單獨(dú)清洗,先用自來(lái)水沖洗,再用去離子水浸泡10分鐘,最后用無(wú)塵布吸干水分,存放于專用干燥盒中,禁止使用硬毛刷刷洗,防止劃傷石英表面。儀器外部清潔可用干布擦拭,避免液體流入儀器內(nèi)部。?
?。ǘ┎考z查:及時(shí)排除潛在故障?
每周檢查光源燈(如氙燈、汞燈)的亮度與使用壽命,若出現(xiàn)閃爍、亮度明顯下降或達(dá)到使用時(shí)長(zhǎng)上限(通常為1000-2000小時(shí)),需及時(shí)更換,更換時(shí)需佩戴手套,避免指紋污染燈體。同時(shí)檢查光學(xué)鏡片(如激發(fā)濾光片、發(fā)射濾光片)是否有劃痕、污漬,若有污漬可用專用鏡頭紙蘸少量鏡頭清潔劑輕輕擦拭,禁止用普通紙巾或酒精擦拭,防止損壞鍍膜。此外,定期檢查儀器的電源線、數(shù)據(jù)線連接是否牢固,避免因接觸不良導(dǎo)致儀器故障。?
三、注意事項(xiàng):保障操作安全與儀器穩(wěn)定?
操作時(shí)需嚴(yán)格遵循儀器說(shuō)明書(shū),禁止在儀器運(yùn)行時(shí)打開(kāi)樣品室或更換部件,防止強(qiáng)光損傷眼睛。樣品液需避免含有腐蝕性物質(zhì),防止損壞比色皿與樣品室。長(zhǎng)期不使用儀器時(shí),需斷開(kāi)電源,蓋上防塵罩,存放于干燥、通風(fēng)、無(wú)強(qiáng)光直射的環(huán)境中,溫度保持在5-35℃,相對(duì)濕度不超過(guò)80%。同時(shí),建立儀器使用與維護(hù)記錄臺(tái)賬,詳細(xì)記錄校準(zhǔn)時(shí)間、標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度、更換部件情況等,便于追溯與管理。