在分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)領(lǐng)域,
賽默飛Proflex梯度PCR儀憑借其性能占據(jù)著重要地位。熟練掌握其特點(diǎn)與操作技巧,對(duì)提升實(shí)驗(yàn)效率和準(zhǔn)確性意義重大。
一、儀器特點(diǎn)
?。ㄒ唬╈`活的模塊化設(shè)計(jì)
Proflex梯度PCR儀提供多達(dá)五種可更換的加熱模塊。研究人員可按需選擇,如3×32孔獨(dú)立模塊,能同時(shí)運(yùn)行三個(gè)獨(dú)立的實(shí)驗(yàn),互不干擾;雙96孔或雙384孔模塊滿足高通量測(cè)序需求;雙槽式模塊則支持特定數(shù)字芯片。這種模塊化設(shè)計(jì)大大增強(qiáng)了儀器的適用性,無(wú)論是少量樣本的精細(xì)實(shí)驗(yàn),還是大規(guī)模的高通量篩查,都能輕松應(yīng)對(duì)。
?。ǘ┫冗M(jìn)的VeriFlex加熱塊技術(shù)
創(chuàng)新的VeriFlex加熱塊由六個(gè)獨(dú)立的peltier加熱塊組成。在PCR優(yōu)化過(guò)程中,每個(gè)加熱塊可獨(dú)立設(shè)定特定溫度值,實(shí)現(xiàn)精確控溫,極大提高了優(yōu)化效率。并且,六塊peltier加熱塊能同時(shí)運(yùn)行多達(dá)六種不同的退火溫度或六個(gè)引物對(duì),讓科研人員能在一次實(shí)驗(yàn)中探索多種反應(yīng)條件,快速找到最佳實(shí)驗(yàn)參數(shù)。
?。ㄈ┍憬莸倪h(yuǎn)程操作功能
借助免費(fèi)的移動(dòng)應(yīng)用程序或ThermoFisherCloud,科研人員能在任意地點(diǎn)遠(yuǎn)程連接儀器。無(wú)論身處辦公室、家中,還是外出參加會(huì)議,都可隨時(shí)查看儀器運(yùn)行狀態(tài)、獲取模塊可用性通知,甚至遠(yuǎn)程編輯和上傳實(shí)驗(yàn)程序。這一功能打破了空間限制,為忙碌的科研工作帶來(lái)了極大便利。
(四)精準(zhǔn)的溫控系統(tǒng)
儀器具備出色的溫控精度,溫度均勻性高,變溫速率快。在PCR反應(yīng)關(guān)鍵的變性、退火、延伸步驟中,能迅速且精準(zhǔn)地達(dá)到并維持設(shè)定溫度,確保反應(yīng)的高效性與穩(wěn)定性。即使處理復(fù)雜的實(shí)驗(yàn)需求,也能保障結(jié)果的可靠性與重復(fù)性。
(五)簡(jiǎn)潔易用的操作界面
Proflex配備全新的8.4英寸彩色觸摸屏,圖形用戶界面直觀易懂。實(shí)驗(yàn)人員可通過(guò)簡(jiǎn)單觸摸操作,快速完成實(shí)驗(yàn)程序的創(chuàng)建、編輯與運(yùn)行,極大降低了操作門檻。同時(shí),熱學(xué)模擬模式能模擬多種舊型號(hào)PCR儀的變溫速率,方便習(xí)慣舊儀器的用戶快速上手,實(shí)現(xiàn)無(wú)縫過(guò)渡。
二、操作技巧
?。ㄒ唬?shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備
仔細(xì)檢查儀器外觀,確保無(wú)損壞。連接好電源,開(kāi)機(jī)等待儀器完成初始化。
根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求,精確配置PCR反應(yīng)混合物,注意各組分添加順序與量的準(zhǔn)確性,避免產(chǎn)生氣泡。
選擇適配的PCR管或孔板,將反應(yīng)混合物小心加入,確保每管或每孔體積一致,隨后放入儀器加熱模塊,注意放置穩(wěn)固。
?。ǘ┏绦蛟O(shè)置
點(diǎn)擊觸摸屏“NewMethods”,若有合適模板可選擇“opentemplate”創(chuàng)建程序,否則選“BlankTemplate”,再選“GeneralPCR”進(jìn)入設(shè)置界面。
精準(zhǔn)設(shè)置溫度、時(shí)間、熱蓋溫度、反應(yīng)體積及循環(huán)數(shù)等參數(shù)。如需添加或刪除步驟、階段,點(diǎn)擊“ManageStages”進(jìn)行操作。
若需使用梯度功能,點(diǎn)擊“AdvancedOptions”中的“VeriFlex”,合理設(shè)置梯度范圍,一般相鄰梯度間隔0.1-5℃,以篩選最佳退火溫度。
(三)運(yùn)行與監(jiān)控
程序設(shè)置完成并確認(rèn)無(wú)誤后,保存程序,選擇要使用的加熱模塊,點(diǎn)擊“StartRUN”啟動(dòng)實(shí)驗(yàn)。
實(shí)驗(yàn)運(yùn)行中,通過(guò)觸摸屏實(shí)時(shí)監(jiān)控反應(yīng)進(jìn)度與溫度曲線,關(guān)注儀器有無(wú)異常報(bào)警。若需暫停、繼續(xù)或停止實(shí)驗(yàn),可點(diǎn)擊相應(yīng)按鈕操作。
?。ㄋ模?shí)驗(yàn)后處理
反應(yīng)結(jié)束,打開(kāi)熱蓋,小心取出樣本,及時(shí)清理儀器內(nèi)部,防止殘留試劑污染。
關(guān)閉儀器電源,保持儀器清潔,定期對(duì)儀器進(jìn)行校準(zhǔn)與維護(hù),確保長(zhǎng)期穩(wěn)定運(yùn)行。
賽默飛Proflex梯度PCR儀以其強(qiáng)大特點(diǎn)為科研助力,熟練運(yùn)用操作技巧,能讓儀器發(fā)揮最大效能,為分子生物學(xué)研究提供有力支持。